关键参数速览
| 参数 | 典型取值 |
|---|---|
| 线性范围 | 吸光度 <0.05 |
| 猝灭阈值 | 吸光度 >0.1 |
| 猝灭类型 | 浓度/动态/静态 |
| 解决方法 | 稀释到线性范围 |
| Stern-Volmer | I0/I=1+Ksv[Q] |
| 内滤效应 | 激发光被吸收 |
| 猝灭剂 | KI(测试用) |
内容概览
直接回答
荧光猝灭分浓度猝灭(高浓度自吸收)和动态猝灭(杂质碰撞);稀释样品到线性范围(吸光度 <0.05)可消除浓度猝灭。
判断要点:荧光强度与浓度不成正比(弯曲)即猝灭。
本页针对一个具体的监测设备或现场问题给出可执行的判断:先给结论,再列判断依据与现场核查项。核查建议为通用工程参考,具体以设备说明书与厂商支持为准,涉及安全事项由持证人员操作。
判断依据
- 荧光猝灭类型:浓度猝灭(高浓度自吸收)、动态猝灭(杂质碰撞)、静态猝灭(复合物)。
- 浓度猝灭:吸光度 >0.05 时,荧光强度与浓度不成正比。
- 内滤效应:样品吸光度高,激发光在到达荧光区前被吸收。
- 解决:稀释样品到吸光度 <0.05,进入线性范围。
- 动态猝灭:加猝灭剂(如 KI)可测试猝灭类型。
现场核查项
- 配标准曲线:不同浓度标准品,测荧光强度。
- 若曲线弯曲(非线性),即浓度猝灭。
- 稀释样品到吸光度 <0.05,重新测。
- 若仍猝灭,检查样品纯度(是否有猝灭杂质)。
- 用 Stern-Volmer 方程判断猝灭类型:I0/I = 1 + Ksv[Q]。
相关问题
常见问题
荧光线性范围?
吸光度 <0.05 时线性;>0.1 时猝灭明显。
怎么判断猝灭类型?
Stern-Volmer 方程:I0/I 对 [Q] 作图,线性=动态猝灭。




